Overview

	Un salto cualitativo en el procesamiento de imágenes de células vivas El microscopio LV200 ha sido diseñado detenidamente para proporcionar bioluminiscencia celular de larga duración. Su diseño óptico totalmente nuevo aumenta espectacularmente la sensibilidad y permite el estudio detallado de células fotosensibles y sondas luminiscentes a altos aumentos. El sistema integrado de control de temperatura, humedad y flujo de gas ayuda a mantener las células de cultivo o las muestras de tejido en buen estado durante todo el periodo de observación. Además, su exclusiva carcasa hermética protege a la muestra y a los componentes ópticos de la luz exterior. Contáctenos

Un salto cualitativo en el procesamiento de imágenes de células vivas

El microscopio LV200 ha sido diseñado detenidamente para proporcionar bioluminiscencia celular de larga duración. Su diseño óptico totalmente nuevo aumenta espectacularmente la sensibilidad y permite el estudio detallado de células fotosensibles y sondas luminiscentes a altos aumentos. El sistema integrado de control de temperatura, humedad y flujo de gas ayuda a mantener las células de cultivo o las muestras de tejido en buen estado durante todo el periodo de observación. Además, su exclusiva carcasa hermética protege a la muestra y a los componentes ópticos de la luz exterior.

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Procesamiento de imágenes respetuoso de las células

La luminiscencia proviene de la muestra y no es tóxica para las células. Tampoco genera ruido de fondo ni autofluorescencia. Por lo tanto, la luminiscencia es la luz más apropiada para el procesamiento de imágenes de células vivas.

Microscopía de bioluminiscencia avanzada

La luminiscencia ofrece diversas ventajas potenciales con respecto a la fluorescencia, como mejores índices entre señal y ruido de fondo debido a la falta de emisiones de fondo y la ausencia de fototoxicidad y fotoblanqueo. Por todo ello, es ideal para hacer un seguimiento cuantitativo de los cambios en los sistemas de células vivas a largo plazo. La observación de la luminiscencia se ha visto frenada anteriormente por varios desafíos técnicos. En el sistema LUMINOVIEW LV200, Olympus ha desarrollado con éxito un sistema de microscopio de luminiscencia que supera estos desafíos y aprovecha todo el potencial del procesamiento de imágenes de bioluminiscencia por primera vez en un sistema comercial.

Superar las limitaciones de la fluorescencia

Los microscopios de fluorescencia y las técnicas relacionadas tienen muchas ventajas, pero también algunas limitaciones. El procesamiento de imágenes de bioluminiscencia tiene el potencial de superar estas limitaciones. El exclusivo diseño óptico del nuevo microscopio LV200 de Olympus reúne todas las ventajas de la fluorescencia y la bioluminiscencia para crear un sistema que puede adquirir imágenes brillantes en alta resolución.

Superar las limitaciones de la fluorescencia

Fluorescencia

Las emisiones fluorescentes suelen ser brillantes y breves, y requieren frecuencias específicas de luz para la excitación. Como resultado, esta iluminación es necesaria en el momento del procesamiento de imágenes, lo que significa que el sistema óptico debe ser capaz de suministrar una luz fuerte y controlable de forma completa en una longitud de onda, y proyectar asimismo la luz emitida en una longitud de onda diferente a la cámara y/o los ojos del usuario. Si bien estos requisitos ópticos son relativamente complejos, las técnicas de fluorescencia han progresado y facilitan descubrimientos innovadores en muchas áreas de investigación.

Procesamiento de imágenes de bioluminiscencia

Las emisiones de luminiscencia suelen tener ciclos de vida diferentes y ser débiles, debido a la falta de fondo o fluorescencia que puede medirse con una óptima relación de señal y ruido. Esto hace que la luminiscencia sea ideal para aplicaciones en las que existe una autofluorescencia fuerte, como el procesamiento de imágenes de animales enteros o en muestras que contienen varios compuestos de las bibliotecas químicas. Los sistemas de procesamiento de imágenes in vivo y los lectores de luminiscencia de microplaca han demostrado tener mucho éxito en estas áreas.

Óptima relación de seña-ruido sin blanqueo/toxicidad

El procesamiento de imágenes de bioluminiscencia tiene grandes ventajas con respecto al procesamiento de imágenes de fluorescencia, ya que combina una óptima relación de señal-ruido sin efectos de blanqueo/fototoxicidad. Y, lo más importante, es que solo las células viables emiten señales de luminiscencia, ya que la emisión es posible sólo con un metabolismo en funcionamiento. El resultado de ello son mediciones de bioluminiscencia idóneas para células vivas sensibles, y cuantitativas de forma absoluta y directa. Estas ventajas ya no se limitan al procesamiento macrométrico de las imágenes ni a las mediciones en lote, sino que también pueden aplicarse a la microscopía de alta resolución.

Imágenes de alta calidad

Olympus ha desarrollado el sistema de procesamiento de imágenes de bioluminiscencia LUMINOVIEW LV200 que ofrece imágenes increíblemente detalladas gracias a sensores CCD estándar en lugar de detectores de fotones especiales. Por consiguiente, el diseño óptico del sistema está altamente especializado para maximizar la captación de luz, un aspecto esencial si tenemos en cuenta los bajos niveles de luz emitida.

Trayectoria de luz optimizada

La trayectoria de luz del objeto a la cámara es recta y lo más corta posible para permitir que llegue el máximo de luz posible al chip del CCD. Tampoco es necesario utilizar cubos, filtros ni lentes adicionales para absorber la luz, lo que reducen todavía más la señal. Además, la lente del tubo ha sido diseñada con una apertura numérica extremadamente alta, que permite conseguir un amplio aumento de la sensibilidad en comparación con los dispositivos ópticos de los microscopios convencionales. Como resultado, el LV200 genera salidas de señales mucho más altas que los sistemas tradicionales y, por lo tanto, pueden usarse con las cámaras convencionales CCD o EM-CCD. El LV200 puede usar diversas magnificaciones que van de 0,8x a 20x, lo que permite procesar imágenes que van de grandes secciones de cerebro a células individuales con una claridad absoluta.

	Procesamiento de imágenes en alta resolución Estas propiedades únicas garantizan una extraordinaria resolución de células individuales que anteriormente no era posible con el procesamiento de imágenes de luminiscencia. Estas mejoras, junto con el número de sondas luminiscentes que están disponibles en la actualidad, han llevado el procesamiento de imágenes microscópicas a otro nivel. Las propiedades también permiten obtener una excelente resolución espacial para poder diferenciar fácilmente las señales débiles cerca de las áreas con señales altas, lo que resulta imposible en un luminómetro.

Procesamiento de imágenes en alta resolución

Estas propiedades únicas garantizan una extraordinaria resolución de células individuales que anteriormente no era posible con el procesamiento de imágenes de luminiscencia. Estas mejoras, junto con el número de sondas luminiscentes que están disponibles en la actualidad, han llevado el procesamiento de imágenes microscópicas a otro nivel. Las propiedades también permiten obtener una excelente resolución espacial para poder diferenciar fácilmente las señales débiles cerca de las áreas con señales altas, lo que resulta imposible en un luminómetro.

Uso en entornos de laboratorios comunes

El recinto compacto y ligero del LV200 protege las muestras y los componentes ópticos de la luz externa, y favorece el uso del microscopio bajo la luz ambiental en entornos de laboratorio. Para aplicaciones o muestras que requieren tiempos de exposición muy largos, puede que requiera mover el microscopio a una sala poco iluminada.

Ampliar las capacidades actuales del procesamiento de imágenes

Gracias a componentes ópticos optimizados para la detección de luz luminiscente, el LV200 ha sido diseñado para satisfacer los requisitos de una amplia serie de procesos de investigación. Cuenta con ruedas de filtros de emisión y excitación integradas para permitir la luminiscencia de doble color y el procesamiento de imágenes de fluorescencia de luz transmitida. Con inserciones de contraste de fases e iluminación de campo claro estándar, las áreas objetivo de la muestra pueden encontrarse fácilmente antes de cambiar a la detección de luminiscencia. Por lo tanto, es posible generar superposiciones fluorescentes y luminiscentes en imágenes de campo claro, las cuales proporcionan funciones de localización y colocalización que anteriormente no eran posibles.

Ampliar las capacidades actuales del procesamiento de imágenes

	En incubación Junto con las capacidades de procesamiento de imágenes a largo plazo del sistema, es importante que las muestras puedan ser dejadas en la platina durante todo el experimento. El LV200 ha sido diseñado para poder colocar las muestras dentro de una cámara ambiental de alta precisión, dotada de un control de temperatura independiente para la platina, la cámara de incubación, la cubierta superior y el objetivo. Además, se usa un depósito de agua que permite mantener un nivel de humedad apropiado y un control de flujo de CO2 que favorece la estabilidad del pH. Este control ambiental ayuda a monitorizar las muestras durante días o incluso semanas, sin tener que desplazar las muestras del microscopio a la incubadora o viceversa.

En incubación

Junto con las capacidades de procesamiento de imágenes a largo plazo del sistema, es importante que las muestras puedan ser dejadas en la platina durante todo el experimento. El LV200 ha sido diseñado para poder colocar las muestras dentro de una cámara ambiental de alta precisión, dotada de un control de temperatura independiente para la platina, la cámara de incubación, la cubierta superior y el objetivo. Además, se usa un depósito de agua que permite mantener un nivel de humedad apropiado y un control de flujo de CO2 que favorece la estabilidad del pH. Este control ambiental ayuda a monitorizar las muestras durante días o incluso semanas, sin tener que desplazar las muestras del microscopio a la incubadora o viceversa.

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Specifications

Métodos de observación	Procesamiento de imágenes de luminiscencia, campo claro transmitido, fluorescencia transmitida básica
Cuerpo principal del LV200	Caja oscura estanca
	Enfoque manual de la lente del objetivo
	Platina XY coaxial
	Rueda de filtro de excitación motorizada con tres posiciones para filtros ópticos estándar de 25 mm
	Rueda de filtro de excitación motorizada con seis posiciones para filtros ópticos estándar de 25 mm
	Condensador para campo claro transmitido acoplado a la guía de luz
	Soporte en C para cámara
	Lente de tubo optimizada para procesamiento de imágenes de luminiscencia, magnificación de 0,2 X
Unidad de iluminación	Recinto de lámpara halógena externa acoplado con guía de luz
Controlador	Controlador IX-UCB para ruedas de filtro e iluminación
Conmutador manual	Conmutador manual para ruedas de filtro e iluminación
Control ambiental	Incubadora de tipo cámara a doble cubierta para placas de 35 mm con controlador, calefactor de platina, calefactor de cubierta superior,
Control ambiental	calefactor de cuerpo principal, calefactor de objetivo, caudalímetro para 5 % CO2, 95 % de aire
Tabla del sistema	Aprox 600 (anch.) x 600 (prof.) mm x 700 (alt.). Necesario si se usa una cámara de grandes dimensiones.
Opciones de cámara	Dependiendo de la aplicación y la sensibilidad necesaria, pueden usarse cámaras CCD refrigeradas, cámaras EM-CCD o cámaras CCD
Opciones de cámara	de escaneo lento y refrigeración profunda. Pregunte la compatibilidad del software y la cámara.
Consumo de energía	Unidad principal de 850 VA
Consumo de energía	Controlador de 840
Espacio de instalación	Aprox. 1500 (anch.) x 750 (prof.) mm, dependiendo de la configuración.
Peso de masa total	Aprox. 70 kg, dependiendo de la configuración.

Objetivos recomendados

	A. N.	D. T. (mm)	Corrección (mm)
UPLSAPO 10X	0,4	3,1	0,17
UPLSAPO 20X	0,75	0,6	0,17
UPLSAPO 40X	0,9	0,18	0.11 - 0.23
UPLSAPO 60XO	1,35	0,15	0,17
UPLSAPO 100XOI	1,4	0,13	0,17
LUCPFLN 20X	0,45	6.6 - 7.8	De 0 a 2
LUCPFLN 40X	0,6	2.7 - 4	De 0 a 2
PLAPON 60XO	1,42	0,15	0,17