活细胞的超分辨率成像：小事项的重点

在本次网络研讨会上，Stefan、Lauren 和 Chunsong 将讨论如何更轻松地创建超分辨率图像。Olympus 超分辨率使用 IXplore SpinSR 旋转转盘式共聚焦系统，将速度、灵敏度和分辨率结合起来，实现与活细胞兼容的超分辨率成像。他们将解释创建超分辨率图像所涉及的步骤，包括光学重新分配、傅里叶分析和 3D 解卷积。

主讲人：

Stefan Marawske，高端生命科学系统高级销售专员
生命科学显微术产品经理 Lauren Alvarenga
Chunsong Yan，生命科学商务拓展经理

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常见问题解答

网络研讨会常见问题解答 | 活细胞的超分辨率成像

IXplore-SpinSR 系统相对于宽场结构化照明显微镜有哪些优势？

速度是使用 IXplore SpinSR 显微镜的主要优势之一。在宽场显微镜上，光栅必须旋转多次，而且相机的曝光时间限制了多次曝光的速度。在 IXplore SpinSR 系统上，基于转盘式光学系统消除了对结构化照明光栅的需要，因此您可以更快地采集图像，并且帧数更少。另一个优点是 IXplore SpinSR 显微镜具有更好的深度功能。由于其共聚焦功能，您可以使用更厚的样本，并且仍然可以获得更好的图像。

达到 120 nm 分辨率是否需要 3D 反卷积？

专用硬件光学器件和 Olympus 超分辨率 (OSR) 算法是该系统的关键组件，可实现 120 nm 分辨率。但是，反卷积将进一步提高图像质量和对比度。

什么软件运行 Olympus IXplore SpinSR 显微镜？

该系统由 Olympus cellSens 软件运行，该软件广泛用于 Olympus 显微镜，可以立即识别正确的硬件。此外，用户界面简单直观。

Olympus IXplore SpinR 显微镜有哪些检测系统，帧速率是多少？

成像时，像素越小，分辨率越高。对于较小的像素，您需要有更好的灵敏度，还需要注意噪声，因此 Peltier 制冷的科研级 CMOS 相机是首选。我们使用的是 2k×2k 科研级相机，量子效率超过 80%。然而，主要的限制是样品。如果您有一个更亮的样品，您的相机的曝光时间决定了帧速率，而您将不必获取多个图像来构建一个超分辨率图像。所以，如果每次曝光都能得到一张超分辨率图像，则可以达到每秒 100 帧。此外，系统还为您提供了两个相机的选项，使您能够同时拍摄两种颜色的图像。然而，该系统还配备了内置的快速发射滤光片，使您能够根据激光器和发射滤光片的数量进行快速顺序多色成像。

IXplore SpinSR 系统配备了哪些类型的激光器？

我们提供常规共聚焦显微镜所具有的所有常规激光器。我们的固态激光器非常坚固、稳定，比传统的气体激光器寿命更长，标准配置为 405、488、560 和 640。

您能使用 Olympus IXplore SpinSR 系统进行高内涵筛查吗？

是的，当然可以。Olympus 提供先进的 scanR 高内涵筛查软件。该软件具有许多独特的功能，例如最新的自学习 AI 模块（深度学习）。其还具备一个强大的交互界面，可以执行多级扫描，并且用途极其广泛。特别是高内涵筛查，由于 scanR 软件内置的并行采集功能，其实现了非凡的速度和准确性。

是否可以在 IXplore SpinSR 系统上结合共聚焦成像进行光刺激实验？

可以。此外，系统的实时控制器可以通过 TTL 控制较旧的硬件，对于依赖时间的实验来说，会更为精确。

您的物镜有球面像差校正环吗？它们容易调整吗？

我们提供带校正环的应用导向的物镜，其具有较长工作距离，以硅油为介质。其有一个校正环，硅油与样品的折射率更接近，所以您可以采集球差更小的而深度更深的图像。我们还有一些特殊的高数值孔径物镜，设计了 NA 为 1.5 的复消色差物镜，并配备了一个可在不同温度下设置的校正环。所以，在理想情况下，如果您使用的是 30 倍硅油物镜，则可以达到 200 微米。

IXplore SpinSR

IXplore SpinSR系统是我们的共焦超分辨率显微镜，针对活细胞样本的3D成像进行了优化。与IXplore Spin系统一样，它也具有转盘式系统，可实现快速3D成像，同时限制光毒性和光漂白。但它可以实现精细到120 nm XY的超分辨率图像，并使您能够通过点击按钮在宽视场、共焦和超分辨率之间切换。

得益于奥林巴斯超分辨率(OSR)，可实现精细到120 nm XY的清晰锐利超分辨率成像
因光毒性和光漂白降低，共聚焦延时成像期间的细胞存活时间变长
同时使用两台相机实现快速双色超分辨率成像
使用数值孔径(NA)为1.5、全球较早推出的平面复消色差物镜实现超分辨率成像*

*截至2018年11月。根据奥林巴斯的研究结果。

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Q: Olympus IXplore SpinR 显微镜有哪些检测系统，帧速率是多少？

成像时，像素越小，分辨率越高。对于较小的像素，您需要有更好的灵敏度，还需要注意噪声，因此 Peltier制 冷的科研级 CMOS 相机是首选。我们使用的是 2k×2k 科学相机，量子效率超过 80%。然而，主要的限制是样品。如果您有一个更亮的样品，您的相机的曝光时间决定了帧速率，而您将不必获取多个图像来构建一个超分辨率图像。所以，如果每次曝光都能得到一张超分辨率图像，则可以达到每秒 100 帧。此外，系统还为您提供了两个相机的选项，使您能够同时拍摄两种颜色的图像。然而，该系统还配备了内置的快速发射滤光片，使您能够根据激光器和发射滤光片的数量进行快速顺序多色成像。

在本次网络研讨会上，Stefan、Lauren 和 Chunsong 将讨论如何更轻松地创建超分辨率图像。Olympus 超分辨率使用 IXplore SpinSR 转盘式共聚焦系统，将速度、灵敏度和分辨率结合起来，实现与活细胞兼容的超分辨率成像。他们将解释创建超分辨率图像所涉及的步骤，包括光学重新分配、傅里叶分析和 3D 反卷积。