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独特的FLUOVIEW FV10i是一款全自动的激光扫描共聚焦显微镜。全新的工程设计将显微镜整合进多种功能的独立组件,使得即使缺乏经验的用户和初次使用仪器的用户都可以轻松高效地获取高质量的共聚焦图像。Olympus使用高质量的光学组件和智能简便的软件,为追求完美的人机体验和获取高品质图像提供了优质的平台。
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一个独特、易于使用、占位小的独整机式激光扫描共聚焦显微镜
FV10i具有独特的一体化设计。简洁优化的结构设计将包括培养箱和激光耦合器等关键组件集成到一体化组件中,而且不会影响性能。系统组装更容易,操作更简单,提供了与高端激光扫描共聚焦显微镜相同的功能,同时还增加了防震装置和遮光罩。因此,无论是新手,还是有经验的用户都可以操作。FV10i的占位较小,可以安装在任何实验室中,而且不需要准备专用暗室。
1.无需暗室 | 显微镜机身和遮光盖整合成一体。与需要暗室的传统激光扫描共聚焦显微镜不同,FV10i在常规实验室中也可以轻松使用。 |
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2.扫描单元 | 系统配备有一个会根据扫描单元上的荧光染料自动设置条件的检测器。因此可以在最适合每一个荧光染料的条件下实施成像。 |
3.显微镜功能 | FV10i集优异的光学和机械模块于一体。可以使用10×、60×的物镜和光学变焦采集分辨率从10×到600×的图像。 |
4.防震功能 | 配有内置的防震装置。不需要额外防震台,可以直接安置在实验桌面上。 |
5.激光耦合器 | 配有四个二极管激光单元,与传统的共聚焦系统相比,每个单元都采用了使用寿命更长、更节能的紧凑型二极管激光器。 |
配备4个二极管激光器
系统配有四个 (405/473/559/635nm) 激光器。多标记的标本可以使用多达四个荧光染料成像。每一个激光单元均采用了免维护、节能、使用寿命更长的二极管激光器,操作噪音低。
检测器采用一种新开发的光谱分光方法
检测机械装置具有两个荧光通道和一个相衬通道。荧光通道使用了新开发的光谱方法包含光栅、分光镜和相衬环。此外,它们都配备了可变的吸收滤色片功能,可以根据荧光染料的特性自动设置最合适的波长宽度。
两种序列模式
FV10i配备有两种序列扫描模式。通过序列线扫方式获取图像,不会对两种荧光染料的成像形成窜色,如使用三种或四种染料则以序列面扫的方式使用虚拟通道功能进行扫描。
系统配有10×和60×的物镜
系统配备有10×和60×的物镜。变焦倍率可以在10×到600×之间连续改变。可以根据标本大小设置最适合的成像区域。
精简的内置培养箱
系统具有一个精简的内置式培养箱,可以轻松对活细胞进行时间序列成像,大大节省了浪费在设置设备上的宝贵时间。培养室中的环境维持在温度为37摄氏度、湿度为90%、二氧化碳浓度为
5%的水平*。支持长达三天的时间序列成像。
*要将培养皿的二氧化碳浓度保持为5%,建议以150毫升/分钟的量注入6%的二氧化碳。
提供了一个专用的培养仓
系统配备一个直径35毫米玻璃底培养皿的专用培养仓。
时间序列实验过程中可以用于更换培养基和添加药剂。此外,培养仓可以进行高压灭菌。
稳定的时间序列成像
不仅是培养箱,而且周围的空间均保持在37摄氏度*。因此,进行时间序列成像时可以保障细胞活性。
*环境温度波动可能会影响聚焦稳定性。
自动为水浸物镜加水
新开发的自动加水系统使FV10i可以为水浸物镜的顶部加水。因此在进行长时间延时成像时无需考虑浸液量不足的问题。物镜被移动至观察位置时就会自动加水。
盖玻片厚度检测和自动调节校正环
系统具备检查盖玻片厚度的能力,当使用水浸物镜时,可以自动调节物镜校正环。保证了每次都在最佳条件下成像。
支持多区域时间序列成像
系统配备有电动载物台,可以进行多区域的时间序列成像。单个培养皿 (孔)
上可以指定十个点作为采集位置。例如,使用三个直径为35毫米的玻璃底培养皿时,最多可以采集30个位置。适用于某些特殊的实验。
环境可能改变-但焦面始终不变
以激光为基础的Z轴防漂移补偿 (ZDC) 系统保障了长时间的观察,并校正任何焦点偏移现象发生。
每个用户都可以毫无压力地操作
用户只需完成两个手动步骤:将标本放置在载物台上,并闭合上盖。然后,精密的用户界面会提供清晰和有效的显微镜操作。例如使用新设计的图像大图菜单可以轻 松地选择成像点,而不需要特殊的经验或专业知识。此外,通过使用Olympus产品特有的高级功能,自动聚焦和强度调节等可以根据标本类型和所需的观察模 式设置成像条件。此外,系统配备有导航功能,可以标识成像程序的操作步骤并指导用户进入下一个适当的操作。因此,FV10i共聚焦激光扫描显微镜提供了一 个即使是初次使用的用户都可以毫无压力的舒适操作环境。
设置
放置标本,选择荧光染料。FV10i会根据选择的荧光染料自动选择最合适的成像条件。
图像大图菜单
只需单击<开始>按钮,即可自动创建标本的预览图像。然后,用户可以很容易地选取所需的图像采集位点。
图像采集
使用精准的操作软件可以快速设置图像采集区域或放大倍率。然后单击按钮完成图像采集。
载入标本之后,在“获取大图图像”窗口中简单地单击<开始>按钮即可采集大图图像。通过标本的概览图,用户可以快速、容易地选择要采集的成像区。
创建大图区域
大图图像为用户提供可能的图像采集区域的概览图。根据使用的标本固定夹类型,如35毫米直径的培养皿或载玻片,会以示意图形式自动显示可选择的大图区域。 在图表上单击所需的扫描区域可以选择区域,并采集大图图像。“大图图像”屏幕上显示该区域的概览图。只需要鼠标点击操作即可选择另外一个区域。
选择荧光染料
每个荧光染料都可以显示一张单独的大图图像。这些图像可以分别显示,或以组合通道的形式同时显示。
扫描设置
可以根据实验需求从两种扫描命令中的选择一个。
自动
从中心螺旋向外自动采集预览图像,即使是首次使用的用户都能够容易地识别共聚焦视图区域。
手动
可以直接选择最大面积为9×9的大图图像区域。手动选择比自动选择更高效,因为可以提前缩小ROI (感兴趣区域) 。
可以自动创建一个标本的大图图像
通过自动检测所使用的标本适配器类型可以创建一个大图图像。可以选用高速与低分辨率或低速与高分辨的搭配创建大图图像。
通过采用直观用户界面中缩放功能的预览图像和实时图像扫描可以选择所需的成像区域。人性化的导航功能让初次使用的用户可以轻松采集图像。
观察模式选择 |
有五种类型的观察模式可供选择,包括时间序列、Z轴序列和多位点。
时间序列 在时间序列模式中,每隔预定的间隔连续地采集图像。 Z轴序列 在Z轴序列模式中,图像会在不同的焦面位置上重复采集。可以用于创建三维图像。 Z轴序列 时间序列 组合Z轴序列和时间序列模式进行图像采集。 多区域时间序列 在预先选择的位点上自动进行时间序列成像。 多区域 Z轴序列 时间序列 同时启动三种功能成像。 |
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多区域设置 | 注册多区域模式中的成像区域。可以为每个区域设置适当的成像条件。 |
预览图像 | 显示[采集预览图像]中采集的图像。可以选择特定区域进行更详细的观察。 |
控制屏幕 |
操作各种控制器可以细致地设置成像条件。主要设置包括:
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实时图像 | 显示从预览图像屏幕上所选择的位点。通过预扫和变倍功能确定成像区域。不同的荧光染料可以切换显示。 |
系统配备了界面友好的导航功能
单击<导航>按钮显示操作步骤,高亮显示操作按钮。只需按照导航的引导,即可轻松完成图像采集。
拼接功能
通过采集相邻区域可以实现广角的高分辨率成像。也可以创建整个载玻片的大图图像。
软件ZDC功能 (仅适用于FV10i-LIV)
Z轴防漂移补偿功能 (软件ZDC) 减少了由于时间序列成像过程中温度变化导致的Z轴漂移。
专用Olympus软件为标准规格的一部分,可以对使用FV10i采集的图像进行编辑和分析。
1.3D显示功能 | FV10i支持alpha混合方法和最大强度投影法,用于3D显示功能。此外,系统配备有各种显示功能,允许用户自由地在任何位置上改变3D图像的角度和切面。 | ||||||||
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2.方便的图像搜索 | 主屏幕上可以显示缩略图列表,使用户可以容易地搜索先前的图像数据。 | ||||||||
3.2D分析工具 |
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4.数据管理器 | 数据管理器清晰地显示缩略图和多种图像文件信息。 |
文件输入/输出
使用OIF (Olympus图像格式) 可同时存储多种参数设置和图像。
该软件支持多种常用格式,格式之间可相互转换,包括TIFF、BMP和JPEG。
配有多种标本适配器
该系统配备有标本适配器,可用于直径为35毫米的玻璃底培养皿、载玻片、玻璃底培养室 (8孔位型) ,和多孔板 (8孔位型) 。此外,样品还可以在无污染风险的情况下观察,使用直径为35毫米玻璃底培养皿时加盖密闭的无污染塑料盖。
采集大视场下的相邻图像
对相邻图像成像可以创建大图拼接图像。可以采集高清晰度的大视场图像。
HDD记录可以存储大容量数据
显微镜配备了HDD (硬盘驱动器) 记录功能。采集的图像会自动存储在HDD中。大容量的数据可以即时保存,比如通过长时程时间序列成像采集的图像。成像过程中也可以编辑/分析先前采集的图像。可以将连接到网络上的外部HDD指定为目标路径,在执行独立成像操作的同时可以在远程计算机上查看已保存的图像。
激光装置 > 具有负反馈调节、用于多光子激发的IR脉冲激光 | - | |
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激光装置 > 激光耦合器 |
内置
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激光装置 > 不含AOTF的可见光的单激光 | - | |
激光装置 > 可见光LD激光 > 405nm |
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激光装置 > 可见光LD激光 > 440nm |
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激光装置 > 可见光LD激光 > 473nm |
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激光装置 > 可见光LD激光 > 559nm |
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激光装置 > 可见光LD激光 > 635nm |
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激光装置 > 氦氖(G)激光(543nm,1mW) |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 标准激光接口 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 检测器 > 标准 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 检测器 > 双通道制冷型GaAsP-PMT |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 检测器 > 可选4CH检测器 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 光检测法 > 模拟集成 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 光检测法 > 混合光子计数 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > VIS - UV - IR激发二色镜转盘 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 分光镜转盘 |
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扫描和检测 > 主扫描单元 > 波长选择 | 衍射光栅和狭缝旁用于可任意调节吸收光波段范围的荧光通道 | |
扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 检流计镜式扫描头(X,Y) |
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扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描模式 > 2D | XY | |
扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描模式 > 3D | XYT, XYZ | |
扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描模式 > 4D | XYZT | |
扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描模式 > 5D | - | |
扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描模式 > 其它 |
地图图像,单次扫描
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扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描速度 |
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扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 针孔 |
单驱动
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扫描和检测 > 检流计扫描头(常规成像) > 扫描变倍 |
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扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描模式 > 2D | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描模式 > 3D | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描模式 > 4D | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描模式 > 5D | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描模式 > 其它 | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描速度 | - | |
扫描和检测 > 共振扫描头(高速成像) > 扫描变倍 | - | |
扫描和检测 > 视场数(NA) |
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扫描和检测 > Z-驱动 |
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扫描和检测 > 透射光检测器装置 | 相差:1个通道 | |
显微镜 > 机架 |
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显微镜 > 机架 > 倒置 |
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显微镜 > 物镜和对焦 > 物镜 |
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显微镜 > 物镜和对焦 > 自动对焦(AF) |
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显微镜 > 物镜和对焦 > 供水 |
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显微镜 > 物镜和对焦 > 供油 |
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显微镜 > XY载物台 > XY驱动方法 |
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显微镜 > XY载物台 > 标本架 |
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显微镜 > 培养装置 > 室内环境 |
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显微镜 > 培养装置 > 加热方法 |
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系统控制 > 控制器 |
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系统控制 > 电源装置 | - | |
可选装置 > SIM扫描头 |
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可选装置 > TIRFM装置 |
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可选装置 > 图像采集 | - | |
软件 > 可编程扫描控制器 | - | |
软件 > 2D图像显示 | - | |
软件 > 3D显示与观察 | - | |
软件 > 图像格式 | - | |
软件 > 光谱拆分 | - | |
软件 > 统计处理 | - | |
软件 > 可选软件 | - | |
软件 > 图像获取模式 |
地图图像,单次成像,延时(XYT), Z-系列 (XYZ), Z-系列延时 (XYZT), 多区域延时 (多区域 XYT), 多区域
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软件 > 地图图像获取 | 根据10倍物镜镜头自动选择3×3 -35×7视场的地图图像(最大图像面积根据所用标本夹而各异),手动选择地图获取区域。 | |
软件 > 多区域延时 |
通过电动XY载物台自动实现多区域延时
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软件 > 图像获取区域 | 区域指定:所有区域,剪取的方形区域(最小区域: 96 x 96 像素) | |
软件 > 图像显示 |
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软件 > 减少串扰 | 行序列处理(双通道),或帧序处理(3通道和4通道) | |
软件 > 获取图像文件类型 |
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软件 > 用于观察的图像文件类型 |
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软件 > 图像编辑 | LUT: 伪色设置,对比度调节,备注:输入图形、文本、数值范围等,图像提取,组合 | |
软件 > 3D图像结构 | 3D显示: AlphaBrend法,最大强度投影法,3D动画显示,横截面显示的自由定位 | |
软件 > IR激光控制 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 带扫描装置的显微镜 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 带扫描装置的显微镜 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 带扫描装置的显微镜 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 荧光照明装置 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 荧光照明装置 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 荧光照明装置 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 透射光检测装置 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 透射光检测装置 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 透射光检测装置 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 显微镜控制装置 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 显微镜控制装置 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 显微镜控制装置 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > FV电源装置 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > FV电源装置 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > FV电源装置 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 用于激光耦合器的电源装置 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 用于激光耦合器的电源装置 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 用于激光耦合器的电源装置 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(带多线氩激光头) > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(带多线氩激光头) > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(带多线氩激光头) > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(不带多线氩激光头) > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(不带多线氩激光头) > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 激光耦合器(不带多线氩激光头) > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > LD559激光电源 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > LD559激光电源 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > LD559激光电源 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 多氩激光电源 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 多氩激光电源 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > 多氩激光电源 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > HeNe(G) 激光器电源 > 尺寸(mm) |
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外形尺寸和重量和功耗 > HeNe(G) 激光器电源 > 重量(kg) |
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外形尺寸和重量和功耗 > HeNe(G) 激光器电源 > 功耗 |
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外形尺寸和重量和功耗 > 操作环境 > 室内使用 > 环境温度 | 18 - 28 ℃ (波动 ±2 ℃) | |
外形尺寸和重量和功耗 > 操作环境 > 室内使用 > 最大相对湿度 | 30 - 80 % (无冷凝) |
使用细胞周期标志物Fucci观察干细胞的生理状态
球囊细胞群包括CD-133阳性人体胃癌细胞,它们标记有细胞周期标志物Fucci,在长时间内进行培养和连续观察。
载玻片的上层隔间内,用无血清的培养基培养球囊细胞,球囊细胞保持在干细胞的状态,导致细胞周期中止。
另一方面,载玻片的下层隔间内,使用血清培养球囊细胞,细胞进行分裂,血清是维持细胞分裂状态的关键因素。
这些图像显示这些球囊细胞转入单层培养状态(不再保持干细胞状态)。 激光扫描共聚焦显微镜FV10i能够对厚的球囊细胞进行三维观察。
*使用激光扫描共聚焦显微镜FV10i连续48个小时拍摄了这些图像。 |
图像数据提供方:
Shuya Yano, Toshiyoshi Fujiwara
胃肠病学手术移植科和肿瘤外科,冈山大学医学、牙医和制药学研究生院,
参考资料:
Yano S, Tazawa H, Hashimoto Y, Shirakawa Y, Kuroda S, Nishizaki M, Kishimoto H, Uno F, Nagasaka T, Urata Y, Kagawa S, Hoffman RM, Fujiwara T. 基因工程处理过的溶瘤腺病毒将静止期的癌干样细胞诱导并且将它们致命地困入S/G2/M-期。 Clin Cancer Res.。 December 1, 2013 19:6495-6505.
通过Telomelysin(OBP-301)激活并破坏睡眠期癌症的干细胞
采用telomelysin(OBP-301)、顺铂或射线处理标记有细胞周期标志物Fucci的CD133阳性干样人体胃癌细胞(作为球囊细胞进行培养)。
使用顺铂或射线处理癌细胞丛后,它们保持着相同的尺寸,并且大多数细胞的细胞周期没有超过G1阶段(以红色显示)。
另一方面,采用telomelysin处理的癌细胞丛显示出从红色到黄色和绿色的颜色变化,以及其尺寸的逐渐减小。
这种情况显示,telomelysin抑制了p53和p21的表达,这些都会停止干样细胞的细胞周期。 Telomelysin也增加了E2F-1的表达,这相反导致了细胞周期的激活。
*使用激光扫描共聚焦显微镜FV10i连续8天拍摄了这些图像。 |
图像数据提供方:
Shuya Yano, Toshiyoshi Fujiwara
胃肠病学手术移植科和肿瘤外科,冈山大学医学、牙医和制药学研究生院
参考资料:
Yano S, Tazawa H, Hashimoto Y, Shirakawa Y, Kuroda S, Nishizaki M, Kishimoto H, Uno F, Nagasaka T, Urata Y, Kagawa S, Hoffman RM, Fujiwara T. 基因工程处理过的溶瘤腺病毒将静止期的癌干样细胞诱导并且将它们致命地困入S/G2/M-期。 Clin Cancer Res. December 1, 2013 19:6495-6505.
Fucci诱导的HT29细胞系的球囊化
图像数据提供方:
Dr. Yuji Mishima, Dr. Kiyohiko Hatake
临床化疗科,癌症化疗中心,日本癌症研究基金会
多层成肌细胞层中成纤维细胞的迁移行为和细胞-细胞连接
图像数据提供方:
Eiji Nagamori, Ph.D Masahiro Kino-oka, Ph.D. 生物技术系,工程研究生院,大阪大学 |
使用YFP作为显示剂观察斑马鱼胚胎中的维甲酸信号
图像数据提供方:
Satoshi Shimozono, Ph.D. Atsushi Miyawaki, M.D., Ph.D.
细胞功能动力学实验室,高级技术开发核心,RIKEN脑科学研究所
参考资料:
Shimozono S. et al. Visualization of an endogenous retinoic acid gradient across embryonic development. Nature 496, 363-366 (18 April 2013)
抗体依赖细胞介导的细胞毒性作用(ADCC) 的观察
使用抗体药物西妥昔单抗处理了RPMI 4788细胞(人体结肠癌细胞系),并与自然杀伤细胞ADCC(NK)一起培养,在添加NK细胞后使用FV10i进行观察。
西妥昔单抗:Alexa Fluor 647(红色) NK细胞:ZsGreen(绿色) 检测死亡细胞:DAPI(蓝色) |
图像数据提供方:
Dr. Yuji Mishima, Dr. Kiyohiko Hatake
临床化疗科,癌症化疗中心,日本癌症研究基金会
观察不同浓度抗癌顺铂的效果
观察经过抗癌药物顺铂处理后的HT-29细胞的细胞周期,对表达Fucci(荧光细胞周期指示剂)的HT-29进行时间序列成像。 48小时的培养后,在35 mm的玻底培养皿中以不同浓度的顺铂(对照组(0 ug/ml)、低浓度组(0.25 ug/ml)、高浓度组(2.5 ut/ml))处理这些细胞。 |
图像数据提供方:
Dr. Yuji Mishima, Dr. Kiyohiko Hatake
临床化疗科,癌症化疗中心,日本癌症研究基金会
具有长投射的细胞-细胞融合过程中磷酸肌醇的定位
表达显示剂的RAW264.7细胞的构建是在1 µg/ml强力霉素的作用下用10 ng/ml的RANKL刺激48h。 以红色显示ptdIns(4,5)P2的定位,以绿色显示PtdIns(3,4,5)P3的定位。 34分钟内每隔2分钟拍摄一张图像。标尺,25 µm。 |
图像数据提供方:
Tsukasa Oikawa, Ph.D.
分子生物学系,北海道大学医学研究生院
参考资料:
Oikawa T, et al. Tks5依赖的外周伪足状结构的形成介导细胞-细胞的融合。 J Cell Biol. 197(4):553-568(2012年)。
Hela细胞*1
染料: YFP (肌动蛋白)
物镜:60XW NA1.2 激光波长:473 nm 时间间隔:每隔3.5分钟(总计12个小时) |
小鼠大脑
采用DAPI(细胞核 – 蓝色)、Alexa 488(肌动蛋白 – 绿色)、Alexa 568(神经纤维 – 红色)荧光标记的小鼠大脑。 图像由9 个不同的感兴趣区域组成,以1024×1024的分辨率在Z轴上自动采集14层图像,然后使用FV10i软件拼接在一起。 |
Hela细胞*1
时间间隔:晚上每隔20分钟
绿色:GFP 红色:Mito Tracker Red |
*1 虽然它已经成为医学研究中最重要的细胞系之一,但我们必须认识到Henrietta Lacks对科学的贡献是在未经她同意的情况下发生的。这一不公正现象在导致免疫学、传染病和癌症方面重大发现的同时,也引发了关于医学中的隐私、伦理和同意方面的重要对话。
要了解更多关于Henrietta Lacks的生平和她对现代医学的贡献,请点击这里。
http://henriettalacksfoundation.org/
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