ASTER技术实现了宽视场下的高定位精确度

SAFe纳米显微镜具备相同的独特激发系统，这种系统基于可调谐激发区的适应性扫描（ASTER）技术。¹ASTER在TIRF、HiLo和EPI模式下产生均匀的照明，同时执行SMLM模式（如PALM、STORM或PAINT），在3D中150 x 150 µm²视场（FOV）上的定位精确度达到10-15 nm。

ASTER的示意图和产生的照明模式。

ASTER的照明方法提供了一种新功能，可以利用sCMOS摄像头的整个FOV进行SMLM和TIRF成像。

ASTER使用两个扫描振镜来控制样品平面的照明。当激发光束在后焦面（BFP）保持其位置时，扫描振镜的角度旋转会在BFP中引入一个接近的角度，对应样品平面的不同位置。

通过应用特定的模式（如光栅扫描），ASTER可以为所有的激发模式（EPI、HiLo和TIRF）在最大150 × 150 µm²的可调谐FOV上提供均匀的激发。

_{U2OS细胞的微管（α-微管蛋白抗体）CF660、线粒体（抗TOMM20）CF680和染色质（EdU）AF647接受染色。多色2D dSTORM与光谱同时分层。}

光谱分层：使用一种激光、一种缓冲液和一次采集实现多色成像

尽管3D纳米显微术可获得前所未有的分辨率，彻底改变了荧光显微成像领域，但多色成像在SMLM中仍然具有挑战性。这种困难是由几个因素造成的，包括色差、缓冲液的选择和单分子相容染料的选择。

为了解决这一挑战，Abbelight在SMLM中实现了光谱分层。通过使用滤色块和比率算法拆分远红外染料，光谱分层可以在SMLM中同时进行多色成像。

参考文献

用于SMLM数据分析的功能强大的软件

与生成基于像素的图像的标准荧光显微成像不同，SMLM会产生具有数百万个定位和相关不确定性的点云。Abbelight的NEO软件会将这些数据转化为一个方便用户使用的数据包，既简化了数据采集，还能提供实时图像重建和定量反馈。

NEO软件还可提供处理SMLM数据的强大工具，有助于研究局部单分子的空间和时间分布。这包括使用DBSCAN、Voronoi和共定位算法作为CBC或单粒子追踪算法的聚类分析。

可用的系统

仪器的兼容性